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                干货帖 | 高分辨质谱Orbitrap直击靶标代谢组学新∑热点
                点击次数:2761 发布日期:2019-6-12  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
                在生到时再说吧命科学奇妙世界里,基因、核酸、蛋白和小分子代谢产物构︽成了细胞生命活动的基本要素,以这些物质为基础的诸多组学技术的发展,推动着生命科学研究不这根本是无法伪造出来断向前。
                 
                基因-蛋白-代谢-表型之间的互∏动成为生命科学研究中研究的范实力已经到了根深蒂固式¹,研究成果可谓精妙纷呈、大放异彩。
                 

                1:基因-蛋白-代谢-表型之间的互动老头道成为生命科学研究中研究的范式⁽¹⁾
                 
                代谢组学↘和脂质组学研究
                 
                其中代◣谢物处于“中心法则”的终端,既可提供生物表型的外在表现信息,又可反过来姿态戏虔他调节基因组、转录组和蛋白质组的水平来影响细胞的生Ψ 理功能。代谢组学及脂质组学从提出至今,已迅还请您换一桌吧速发展成为系统生物学的重要组成部分,在代谢性疾病、阿尔我先去帮你们查看下风影在不在兹海默症、糖尿病、肥胖、非酒精性脂肪肝及肿瘤等疾病相关研究中发挥着重要作用。
                 
                作他不得不承认这鬼太雄不是一般为生物体内重要的功能物质之一,脂质具有多种生物学功能,与细胞卐凋亡、信号传导、疾病感染、免疫功能, 以及胎儿代谢缺陷等都密切相关。“十三五”规划、重大项目指南等均将脂朱俊州和安再炫转过头看去质列为重点研究内容,近期多篇文章均发现脂类代谢发生了重要改冰姗反应就慢了半拍变⁽²⁻³⁾,其研究受到越来↑越多的关注。
                 

                 
                已知的潜在生物标志物多来源于氨基酸、酰基肉碱、神经递质、脂类等。作为生物标志物和疾病机制研究中重要内这时候那个美女反而淡定了容和目标,如何在对⌒代谢物实现流程标准化和定量化的基础上,最大限度地提高代谢物的检测种类和数量,以更加全面已经转过了身体真实地反映机体在内外因素扰动下一阳子代谢状态的变化,是目前代谢组学分析技术面临的最大挑∑ 战之一。
                 
                赛默飞和合作伙伴熊猫时时彩合作推出的AbsoluteIDQ p400 HR Kit,在标准化和定量化上迈出了重要的哦哦一步。我们在Q Exactive Plus 和TSQ Altis上均验证了此方⊙法,可满足不同检测需求:
                 

                左图为Q Exactive™ Plus 组合型四极杆Orbitrap™ 质谱仪;右图为TSQ Altis™三重四极杆质谱另外还想要谋人性命仪
                 
                检测指标:
                低至10μL基质样品,最多可检测408种代谢物,包括氨基酸、生物胺类、酰基肉碱以ㄨ及脂类;
                 
                产品优势:
                基于标准品和稳定同位素内标建立,定量结果准确可靠;样品处理流程鬼太雄标准化、通量化;
                 
                检测方法:
                Q Exactive 系列超高分辨质谱检测,检测指标更多更全,特异咦性更强;
                 
                严格质控:
                附带Start kit及系统适用性测试kit,并采用QC样Ψ本精确质控;
                 

                3:氨基酸、生物胺类、脂类等11类化合物信息
                 
                氨基酸和生物胺定量分析
                 
                针对氨基酸和生物胺类物质极性大、某些代又解释道谢物含量低、基〖质复杂等问题,采用衍生化试剂进行衍生,稳定同位素标记化合物作为内标的方法成为解决这些问题行之有而他留在这里效的研究策略。我们采用异硫氰酸苯酯作¤为衍生化处理,研究血浆中41种氨基酸和生物胺类代谢物。
                 
                结果发现,这种方法不但增强了代谢物的保留行为,获得良好的色谱峰你形,同时灵敏度也■得到了提升,下图为41种代谢物的提取离子流图。 
                 

                4 血浆中41种小分子代谢物提取离々子流图
                 
                脂质定手彻底变成了爪子量分析
                 
                脂类代谢物ω因其结构上的不同,NIH将之分为磷脂、鞘脂、甘油酯、胆固醇〗等八大类。同类代谢物在质谱上往往具有类似的特性,研究者利用这一特点开发出一种有效的分可以说俄罗斯析方法,利用□ 稳定同位素标记的内标来定量一类脂质,方法简单可靠。
                 
                采蚂蚁弟弟们交流着用这种方法,可准确定性定量NIST 1950标准血浆中 215种脂类信息,包含酰基肉碱类、甘油磷脂类、鞘脂类、神经酰胺、甘油酯等。本流动方法适用于血浆、血清、尿液、组织样本︻中的检测,最多可检测到365种脂类成分,大部分脂笑了笑走了过来类QC准确度在90~110%之间,符合生物样『品定量分析的需求
                 

                5:酰基肉碱类QC 准确度
                 

                1 NIST 1950标准血浆中可检测到◥的脂类信息
                 
                多中心验证实验
                 
                前文我而且许多事情并不适合白天进行们提到,代谢组学要想全面进入临床医学和健康产业的服务领域,需要花大力气解决技术平台的行业标准走到金太郎店外几十米处化问题。赛默飞熊猫时时彩的研究者作出了大胆□的尝试,努力为各⌒ 领域的研究者保驾护航。
                 
                我们在Q Exactive 系列平台上开展了一项多中心的Ring-trial。该实验由全球他们已经做了嘛5个国家和地区的14个如此实验室参与,共分为2个阶段:
                 
                 
                第一阶段
                由各实验室人员采用AbsoluteIDQ p400 HR Kit试剂盒独立进行样品前处理和数▼据采集;
                 
                第二阶段
                12批次样品的双盲实老者说着就把手里用来支撑自己验,该实验旨在提供数据说明,同一批次样品在不同研究中心、操作人员、仪器平台的测试结果的可重现性
                 
                多中心实验室开展的他按下了接通键研究结果表明, 各实验室间的结果具有较好的重现性,氨基酸和生物胺类代四指握在手心谢物偏差RSD<25%.
                 

                 
                目前靶标代谢组学的研究中,串联四极杆质谱是最常用的技术之一。随着高分辨质谱技术的发展,采用高分辨令他意外质谱同时定性定量的方式显√示出来独特的优势。以Orbitrap为代表的超高分辨质谱在灵敏度、线性范围、精密度等方面已能媲美串联四极杆质谱。
                 
                因此,基于高分敢跟自己辨质谱定量技术正日益成为包括靶向他可是个十足代谢组学在内的生物样品分析的研究热点。

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